Streptavidin-thiol|巰基化鏈霉親和素
簡要描述:Streptavidin-thiol|巰基化鏈霉親和素是一種經(jīng)過化學(xué)修飾的鏈霉親和素,專門用于生物研究和診斷中的生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)。
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- 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間:2024-10-25
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Streptavidin-thiol|巰基化鏈霉親和素
巰基化鏈霉親和素(Streptavidin-thiol),是一種經(jīng)過化學(xué)修飾的鏈霉親和素,專門用于生物研究和診斷中的生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)。以下是對巰基化鏈霉親和素的詳細(xì)介紹:
一、定義與特性
鏈霉親和素是一種高親和力的生物素結(jié)合蛋白,通過在其分子結(jié)構(gòu)上引入巰基(-SH)功能團(tuán),使其能夠進(jìn)一步與其他分子或表面進(jìn)行共價(jià)連接。這種修飾不僅保留了鏈霉親和素對生物素的高特異性和高親和力,還賦予了其更多的生物化學(xué)應(yīng)用特性。
二、制備步驟
巰基化鏈霉親和素的制備通常包括以下步驟:
材料準(zhǔn)備:準(zhǔn)備鏈霉親和素和巰基修飾試劑(如N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯,SPDP)。
溶解與混合:在適當(dāng)?shù)木彌_液中溶解鏈霉親和素,并配制適當(dāng)濃度;將修飾試劑溶解在適量的溶劑中,制備高濃度的修飾試劑溶液。
反應(yīng):將修飾試劑溶液緩慢加入鏈霉親和素溶液中,維持反應(yīng)體系的pH值在一定范圍內(nèi)(如7.5左右),并在室溫下反應(yīng)一段時(shí)間(如1~2小時(shí))。
還原:向反應(yīng)混合物中加入還原劑(如DL-二硫蘇糖醇DTT或三(2-羧乙基)膦TCEP),斷開二硫鍵,釋放出巰基(-SH)。反應(yīng)在室溫下進(jìn)行一段時(shí)間(如1小時(shí))。
純化與保存:通過透析或凝膠過濾去除未反應(yīng)的修飾試劑和還原劑,得到純化的巰基化鏈霉親和素。將純化后的溶液分裝,并低溫保存(如4°C或-20°C),以防止巰基氧化。
三、應(yīng)用
巰基化鏈霉親和素在生物化學(xué)、免疫學(xué)和納米技術(shù)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用:
表面修飾:可用于修飾金納米顆粒、電極、微孔板等,通過巰基與金等表面形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵,從而改變這些表面的生物相容性和反應(yīng)性。
共價(jià)連接:可以與其他含有馬來酰亞胺或其他巰基反應(yīng)性基團(tuán)的分子進(jìn)行共價(jià)連接,用于構(gòu)建復(fù)雜的生物傳感器和診斷試劑。
生物素檢測:可以結(jié)合生物素標(biāo)記的分子,如抗體、核酸、蛋白質(zhì)等,在免疫分析、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞成像等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
四、儲存條件與安全性
巰基化鏈霉親和素應(yīng)在低溫條件下儲存,以防止巰基氧化和蛋白質(zhì)變性。在使用時(shí),應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整其濃度,以獲得最佳的實(shí)驗(yàn)效果。此外,雖然巰基化鏈霉親和素在生物研究中具有廣泛的應(yīng)用,但在使用過程中仍需注意其安全性,避免對人體和環(huán)境造成危害。
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