Streptavidin-Biotin|鏈霉親和素標記生物素
簡要描述:Streptavidin-Biotin|鏈霉親和素標記生物素在將抗體共軛連接到生物素的幫助下(Biotin)使用親和素(avidin,AV)或鏈霉親和素(streptavidin,SA)其檢測方法幾乎可以應(yīng)用于任何免疫測定。
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- 更新時間:2024-09-04
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Streptavidin-Biotin|鏈霉親和素標記生物素
鏈霉親和素標記生物素是一種常見的生物化學(xué)技術(shù),用于在多種生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中實現(xiàn)生物素與鏈霉親和素之間的特異性結(jié)合。以下是對鏈霉親和素標記生物素的詳細解析:
一、鏈霉親和素概述
鏈霉親和素(Streptavidin, SA)是一種由鏈霉菌avidinii分泌的生物素結(jié)合蛋白,具有四個高親和力的生物素結(jié)合位點。它的分子量通常在60-65kDa之間,具體取決于不同的來源和制備方式。鏈霉親和素因其不含碳水化合物側(cè)鏈、等電點接近中性以及低非特異性結(jié)合等特性,被廣泛用作多功能親和標記。
二、生物素概述
生物素(Biotin)是一種水溶性維生素B復(fù)合物,也稱為維生素H或輔酶R。它在生物體內(nèi)參與多種酶的輔基,對脂肪酸、葡萄糖和氨基酸的代謝過程至關(guān)重要。生物素因其特別的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性,常被用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究中的標記和檢測技術(shù)。
三、鏈霉親和素標記生物素的原理
鏈霉親和素標記生物素的原理基于鏈霉親和素與生物素之間的高度特異性結(jié)合。通過化學(xué)方法將生物素與鏈霉親和素偶聯(lián),形成穩(wěn)定的生物素-鏈霉親和素復(fù)合物。這種復(fù)合物在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用,如蛋白質(zhì)印跡、免疫組織化學(xué)、ELISA等。
四、鏈霉親和素標記生物素的應(yīng)用
蛋白質(zhì)印跡(Western Blotting):鏈霉親和素標記的生物素可用于檢測特定蛋白質(zhì)在細胞或組織中的表達情況。通過與特定的抗體結(jié)合,可以實現(xiàn)對目標蛋白的定性和定量分析。
免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry):在免疫組織化學(xué)中,鏈霉親和素標記的生物素可用于染色細胞或組織中的特定抗原。這種技術(shù)有助于研究抗原在細胞和組織中的分布和定位。
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗):在ELISA檢測中,鏈霉親和素標記的生物素可用于放大檢測信號。通過與酶標記的抗體結(jié)合,可以實現(xiàn)對低濃度抗原或抗體的靈敏檢測。
其他應(yīng)用:鏈霉親和素標記的生物素還可用于基因芯片、免疫微孔板、免疫層析硝酸纖維素膜等多種生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中。
五、鏈霉親和素標記生物素的注意事項
儲存條件:鏈霉親和素標記的生物素應(yīng)儲存在適當(dāng)?shù)臏囟葪l件下(如-20℃),以保持其活性和穩(wěn)定性。
操作規(guī)范:在進行鏈霉親和素標記生物素的操作時,應(yīng)嚴格遵守實驗規(guī)范和操作規(guī)程,以確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。
非特異性結(jié)合:雖然鏈霉親和素具有低非特異性結(jié)合的特性,但在某些實驗中仍需注意避免非特異性結(jié)合的影響。
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