菁染料 CY5 標(biāo)記二油?;?span id="raq0dk3" class="mdbox-link-fvWESi" style="-webkit-font-smoothing: antialiased; box-sizing: border-box; -webkit-tap-highlight-color: rgba(0, 0, 0, 0); --color-link-text: var(--s-color-text-secondary,rgba(0,0,0,.85)) !important; --color-link-text-active: var(--s-color-brand-primary-pressed) !important; overflow-anchor: auto; color: initial;">磷脂酰乙醇胺時(shí),可從以下幾方面優(yōu)化反應(yīng)條件:
混合溶劑體系:采用有機(jī)溶劑與緩沖溶液的混合體系效果較好。常用的有機(jī)溶劑如氯仿、甲醇等,能夠較好地溶解 CY5 和二油酰基磷脂酰乙醇胺。緩沖溶液可選用PBS等,為反應(yīng)提供穩(wěn)定的 pH 環(huán)境,一般有機(jī)溶劑與緩沖溶液的體積比可在 1:1 至 3:1 之間進(jìn)行優(yōu)化.}
溶劑純度:使用高純度的溶劑,以避免雜質(zhì)對(duì)標(biāo)記反應(yīng)的干擾。若溶劑中含有水分或其他雜質(zhì),可能會(huì)與 CY5 或二油?;字R掖及钒l(fā)生副反應(yīng),降低標(biāo)記效率。
適宜范圍:標(biāo)記反應(yīng)的 pH 值一般控制在 8.0-9.0 之間較為合適 。在此 pH 范圍內(nèi),CY5 上的活性基團(tuán)(如 NHS 酯)具有較高的反應(yīng)活性,能夠更好地與二油?;字R掖及贩肿由系?span id="1vjll0f" class="mdbox-link-fvWESi" style="-webkit-font-smoothing: antialiased; box-sizing: border-box; -webkit-tap-highlight-color: rgba(0, 0, 0, 0); --color-link-text: var(--s-color-text-secondary,rgba(0,0,0,.85)) !important; --color-link-text-active: var(--s-color-brand-primary-pressed) !important; overflow-anchor: auto; color: initial;">氨基等活性基團(tuán)發(fā)生反應(yīng).
調(diào)節(jié)方法:可使用碳酸鈉或碳酸氫鈉溶液來(lái)調(diào)節(jié)反應(yīng)體系的 pH 值,在調(diào)節(jié)過(guò)程中需緩慢滴加,并充分?jǐn)嚢?,以確保 pH 值的均勻性和穩(wěn)定性。
CY5 濃度:適當(dāng)提高 CY5 的濃度可以增加標(biāo)記效率,但過(guò)高的濃度可能會(huì)導(dǎo)致非特異性標(biāo)記增加。一般 CY5 的終濃度可在 1-10 mM 之間進(jìn)行優(yōu)化,具體濃度需根據(jù)二油?;字R掖及返臐舛群蜆?biāo)記程度的要求來(lái)確定。
比例優(yōu)化:CY5 與二油?;字R掖及返哪柋纫彩怯绊憳?biāo)記效率的重要因素。通??蓮?5:1 至 20:1 的范圍內(nèi)進(jìn)行嘗試,尋找最佳的比例,以實(shí)現(xiàn)高效且特異性的標(biāo)記.
反應(yīng)溫度:一般在室溫(20-25℃)至 37℃之間進(jìn)行反應(yīng)。溫度過(guò)高可能會(huì)導(dǎo)致 CY5 或二油酰基磷脂酰乙醇胺的降解,影響標(biāo)記效率和產(chǎn)物的穩(wěn)定性;溫度過(guò)低則反應(yīng)速度較慢,標(biāo)記時(shí)間會(huì)延長(zhǎng)??上仍谑覝叵逻M(jìn)行反應(yīng),若標(biāo)記效率不理想,再嘗試在 30℃或 37℃下進(jìn)行反應(yīng).
反應(yīng)時(shí)間:反應(yīng)時(shí)間通常在 1-24 小時(shí)之間。較短的反應(yīng)時(shí)間可能導(dǎo)致標(biāo)記不全,而過(guò)長(zhǎng)的反應(yīng)時(shí)間則可能增加非特異性反應(yīng)的發(fā)生。一般可先進(jìn)行小規(guī)模的預(yù)實(shí)驗(yàn),在不同的時(shí)間點(diǎn)(如 1、2、4、6、12 小時(shí)等)取樣檢測(cè)標(biāo)記效率,以確定最佳的反應(yīng)時(shí)間.
透析法:在標(biāo)記前,使用透析袋對(duì)二油?;字R掖及啡芤哼M(jìn)行透析,去除其中可能存在的游離氨基、硫醇等干擾物質(zhì),透析的緩沖液可選用 PBS 或其他合適的緩沖液,透析時(shí)間一般為 12-24 小時(shí),期間需多次更換透析液.
柱層析法:反應(yīng)結(jié)束后,可采用柱層析的方法對(duì)標(biāo)記產(chǎn)物進(jìn)行純化,如硅膠柱層析,以氯仿 - 甲醇混合液等為洗脫劑,將標(biāo)記后的二油?;字R掖及放c未反應(yīng)的 CY5 和其他雜質(zhì)分離開(kāi)來(lái),得到純凈的標(biāo)記產(chǎn)物.
關(guān)于我們:
陜西星貝愛(ài)科生物科技經(jīng)營(yíng)的產(chǎn)品種類包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性納米顆粒、納米金及納米金棒、近紅外熒光染料、活性熒光染料、熒光標(biāo)記物、蛋白交聯(lián)劑、小分子PEG衍生物、點(diǎn)擊化學(xué)產(chǎn)品、樹(shù)枝狀聚合物、環(huán)糊精衍生物、大環(huán)配體類、熒光量子點(diǎn)、透明質(zhì)酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳納米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二氧化硅,聚合物微球,近紅外熒光染料,聚苯乙烯微球,上轉(zhuǎn)換納米發(fā)光顆粒,MRI核磁造影產(chǎn)品,熒光蛋白及熒光探針等等。
溫馨提示:供應(yīng)產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體!
相關(guān)產(chǎn)品:
FITC-Casein,FITC-酪蛋白
Cy5-雌二醇,CY5-β-Estradiol
Cy5-黃芩素,CY5-Baicalein
FITC-甲硫氨酸,FITC-Methionine
Cy5-甜菊柑,CY5-Stevioside
FITC-羧甲基纖維素,FITC-CMC
DBCO-β環(huán)糊精,DBCO-β Cyclodextrin,DBCO-CD
FITC-Collagen膠原蛋白
CY7-膽汁酸,CY7-Cholicacid
CY7-L-巖藻糖,CY7-L-(-)-Fucose